产品货号：
ALH205
中文名称：
鼠尾直接PCR扩增试剂盒
英文名称：
DirectFree Mouse Tail PCR Kit
产品规格：
100T|500T
发货周期：
1～3天
产品价格：
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本制品采用独特的裂解缓冲液快速裂解鼠尾，释放的DNA无需纯化便可以作为模板，用高度耐抑制物的2×DirectFree PCR Mix扩增，扩增产物可直接上样电泳。一般扩增大小<2.5kb。
鼠尾、动物组织（哺乳动物、海洋动物、昆虫等）、细胞等。
| 组分 | 100T | 500T |
| Buffer AD1 | 0.75mL | 3.75mL |
| Buffer AD2 | 7.5mL | 37.5mL |
| 2×DirectFree PCR Mix | 1mL | 5mL |
| ddH2O | 10mL | 50mL |
保存：-20℃，有效期1年。
2×DirectFree PCR Mix置于-20℃保存，避免反复冻融次数过多，3周内短时间使用可放4℃保存。其余常温或者4℃保存，有效期12个月。
- 如果扩增条带较弱，可以适当增加或者减少模板加入量，裂解混合物模板一般可以在1μL～4μL内调节。
- 如果非特异扩增较多，可调整退火温度，或者适当增减模板用量。
- 各溶液使用完毕后，应该立刻盖紧盖子，以免PH改变影响质量。
- 配制即用裂解液：按照10μL Buffer AD1 + 90μL ddH2O = 100μL比例混合配制成即用裂解液。每个样品需要75μL即用裂解液，具体量可以根据样品数量按照比例放大配制即可。即用裂解液可常温存放1个月。
- 取75μL裂解液于0.2mL PCR薄壁管中（没有PCR仪器者也可以用0.5mL离心管）。然后加入1～2mm的鼠尾或者2mm见方的组织（切记不可多加，多加反而抑制下游PCR），样品浸没在裂解液内。
- 98℃裂解30min（建议PCR仪上操作），根据情况裂解时间可以在10分钟～1小时内调整。
- 取出离心管迅速放冰上，加入75μL Buffer AD2，混匀，即可直接用做PCR模板或置于4℃或-20℃保存。
- PCR扩增：
- 配制反应体系：
成分 用量 终浓度 裂解混合物模板 1～2μL as required 2×DirectFree PCR Mix 10μL 1× Forward Primer(10μM) 0.4μL 0.2μM each Reverse Primer(10μM) 0.4μL 0.2μM each ddH2O 至20μL - - PCR反应程序：
温度 时间 循环数 95℃ 5min 1 94℃ 30sec 35～40 54～60℃ 30sec 72℃ 1kb/min 72℃ 5～10min 1
- 配制反应体系：
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